En un estudio reciente publicado en campo de búsqueda* Servidor de preimpresión Los investigadores exploraron la base molecular para una mayor inmunidad contra las cepas de SARS-CoV-2 después de la exposición repetida al antígeno.
antecedentes
La proteína variante del pico Omicron (S) del SARS-CoV-2 contiene varias mutaciones que le confieren propiedades inmunitarias evasivas. Los estudios han informado que la exposición repetida a los antígenos del SARS-CoV-2 por infección natural o vacunación conduce a fuertes respuestas inmunitarias humorales contra omicron; Sin embargo, las vías moleculares que subyacen a estas respuestas inmunitarias no se han caracterizado por completo.
sobre estudiar
En este estudio, los investigadores dilucidan las vías moleculares responsables de mejorar las respuestas humorales resultantes de la exposición repetida al antígeno SARS-CoV-2 contra cepas heterogéneas de SARS-CoV-2.
Las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) se obtuvieron de la enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19) con infección penetrante de la cepa SARS-CoV-2 Delta al momento del alta. Grupo de diferenciación 19 (CD19) Los linfocitos B de memoria CD27 (MBC) asociados con el dominio homólogo de unión al receptor delta (RBD)/subunidad 1 (S1) se aislaron mediante clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS) y se sometieron a secuenciación de una sola célula. .
La composición isotópica del anticuerpo y los subtipos funcionales en los linfocitos B se compararon entre pacientes con infección delta penetrante y pacientes con COVID-19 no vacunados. Los anticuerpos inducidos por la infección delta penetrante se examinaron utilizando anticuerpos monoclonales neutralizantes (mAb).
Solo se analizaron los clones que contenían linfocitos B que expresan inmunoglobulina G1 (IgG1) con tasas de hipermutación somática (SHM) >2 %. Los virus o pseudovirus SARS-CoV-2 originales se utilizaron para probar el potencial de neutralización de 24 mA. [with cross-reaction to the wildtype (WT) and ≥5 SARS-CoV-2 strains such as Alpha, Beta, Gamma, Kappa, Mu, and Lambda].
Entre los 24 mA, 14 y 4 mA mostraron unión de Omicron RBD y reactividad cruzada con SARS-CoV-1 S. Además, se realizaron ensayos de interferencia de biocapa (BLI). Además, la base genética y estructural de los dos anticuerpos ampliamente neutralizantes (bnAbs) más potentes, a saber. Se han explorado amplias actividades de neutralización de YB13-292 y YB9-258. Además, se realizó microscopía electrónica de barrido (EM) para modelar las interacciones de anticuerpos y epítopos y para comprender las vías de neutralización.
consecuencias
La clasificación FACS mostró que los MBC representaban la mayoría (88,8 %) de los linfocitos B. Se observaron cuatro tipos principales de linfocitos B: plasmablastos, linfocitos B vírgenes, MBC cambiados y MBC no transformados. Es de destacar que los MBC de la infección con penetración delta generaron anticuerpos con SHM extensos, lo que mejoró la actividad de bnAb contra cepas heterogéneas de SARS-CoV-2 como las cepas WT, Beta y Delta, incluida la variante Omicron.
YB13-292, YB9-258 y bnAbs codificados por los genes VH3-21 y VH3-53 se identificaron como anticuerpos S RBD de clase 2 y clase 1, respectivamente. El análisis estructural mostró que los anticuerpos caracterizaban un residuo SHM o una inserción inusual de SNIL en el anillo de cadena pesada 2 (HCDR2), que estaba ampliamente implicado en el reconocimiento de epítopos, ampliando la ecuación y mejorando la resistencia a las mutaciones RBD en sitios como 452, 417 , 501 y 484.
Se observó un mayor título de anticuerpos SHM alto (SHM ≥5) entre pacientes con infección delta penetrante (68 %) en comparación con pacientes no inmunizados (60 %) y CoV-AbDab (40 %) (grupo de 3984 SARS-CoV ).- 2 mAbs específicos). Se observó un aumento del 11 % en la proporción de anticuerpos homocigóticos y una expresión génica estable dos veces superior a la de Ig gamma 1 (IGHG1) entre los individuos con una infección avanzada.
Seis mA mostraron la fuerza equivalente de WT, Beta y Delta a la mitad de la concentración inhibitoria máxima (IC).50) valores < 0,05 mg/ml, y el anticuerpo YB13-281 también se unió a SARS-CoV-1 S. YB13-208 y YB9-120 mostraron altas afinidades de unión a las cepas de SARS-CoV-2 (incluido Omicron).
Los ensayos BLI mostraron que las mutaciones Delta y Omicron S no afectaron significativamente la unión de YB13-292 y YB9-258. En el análisis crio-EM, YB9-258 puede unirse a la conformación ascendente y descendente S RBD. Los anticuerpos R1-32 e YB9-258 pueden unirse simultáneamente a los S RBD, lo que permite la formación de protómeros 3:3:3 YB9-258:R1-32:S.
El modelado no mostró ninguna colisión entre la enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2) y YB13-292 y en la unión de RBD, lo que indica que el anticuerpo podría prevenir la fusión del SARS-CoV-2 con las células huésped sin el bloqueo de ACE2.
conclusión
En general, los resultados del estudio mostraron que los anticuerpos con altos niveles de SHM inducidos por la sobreinfección por SARS-CoV-2 mejoran las respuestas inmunitarias humorales (mediadas por anticuerpos) contra cepas heterogéneas de SARS-CoV-2 y la exposición repetida a antígenos de SARS-CoV-2. induce anticuerpos resistentes a la mutagénesis en el SARS-CoV-2 S RBD de varias variantes del SARS-CoV-2.
*Nota IMPORTANTE
Research Square publica informes científicos preliminares que no han sido revisados por pares y, por lo tanto, no deben considerarse concluyentes, guiar la práctica clínica o el comportamiento relacionado con la salud ni tratarse como información establecida.
